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分子量是有機(jī)化合物基本的理化性質(zhì)參數(shù)。分子量正確與否往往代表著所測定的有機(jī)化合物及生物大分子的結(jié)構(gòu)正確與否。分子量也是多肽、蛋白質(zhì)等鑒定中*要的參數(shù),也是基因工程產(chǎn)品報(bào)批的重要數(shù)據(jù)之一。
基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜,具有樣品消耗量少、靈敏度高、測定速度快、易于實(shí)現(xiàn)高通量、可對蛋白進(jìn)行大規(guī)模的鑒定及生物大分子的分子量測定等特點(diǎn),為蛋白質(zhì)研究提供了一種強(qiáng)有力的分析測試手段。簡便,直觀,可直接對大分子混合物進(jìn)行測定,并且基本不產(chǎn)生碎片峰是MALDI-TOF-MS的優(yōu)勢,因此這項(xiàng)技術(shù)在生物大分子分子量測定中得到廣泛應(yīng)用。MALDI-TOF-MS儀器主要由兩部分組成:基質(zhì)附助激光解吸電離離子源(MALDI)和飛行時(shí)間質(zhì)量分析器(TOF)。MALDI的原理是用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜,基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給生物分子,而使生物分子電離的過程。它是一種軟電離技術(shù),適用于混合物及生物大分子的測定。TOF的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道,根據(jù)到達(dá)檢測器的飛行時(shí)間不同而被檢測即測定離子的質(zhì)荷比(M/Z)與離子的飛行時(shí)間成正比,從而實(shí)現(xiàn)對離子的檢測。MALDI-TOF的準(zhǔn)確度高達(dá)0.1%-0.01%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于目前常規(guī)應(yīng)用的SDS電泳與高效凝膠色譜技術(shù),目前可測定生物大分子的分子量范圍為700-600000Da。
百泰派克公司采用Bruker公司的ultrafleXtreme™ MALDI TOF/TOF質(zhì)譜系統(tǒng),為廣大科研工作者提供生物分子分子量測定服務(wù),用于分析目標(biāo)蛋白或多肽的分子量,檢測蛋白二聚體,以及對樣品純度進(jìn)行大體評估。
1. 樣品的需要量約為10-50ug;
2. 樣品純度>90%;
3. 樣品準(zhǔn)備過程中盡量避免表面活性劑,例如SDS、Triton-X等的使用;鹽濃度,例如Tris等也盡量降低;
4. 如果您在準(zhǔn)備樣品的過程中必須要用到表面活性劑以及較高的鹽濃度,我們收到您的樣品后會(huì)*先通過相關(guān)實(shí)驗(yàn)對上述化合物進(jìn)行去除,然后進(jìn)行后續(xù)的分子量測定。
樣品運(yùn)輸
1. 我們推薦您將樣品凍干后進(jìn)行運(yùn)輸,凍干樣品中蛋白非常穩(wěn)定。
2. 液體樣品推薦干冰運(yùn)輸,短途運(yùn)輸冰袋也可以。
注意
膠粒樣品或者轉(zhuǎn)移到PVDF膜上的樣品不適合于分子量測定實(shí)驗(yàn)。
在 MALDI-TOF 的應(yīng)用過程中,除了可以檢測樣品的分子量,還能提供樣品本身純度的信息。如下圖所示,樣品在理論分子量 1046.6Da范圍出現(xiàn)明顯的信號峰,且樣品純度較好。
在技術(shù)報(bào)告中,百泰派克會(huì)為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告,報(bào)告包括:
1. 實(shí)驗(yàn)步驟(中英文)
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)(中英文)
3. 質(zhì)譜圖片
4. 原始數(shù)據(jù)
5. 蛋白質(zhì)分子量和純度分析結(jié)果
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務(wù)完成:樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告
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